《中華中醫藥雜志》2012年01期
胡小勤
【作者單位】：廣西中醫學院；
【摘要】：
血管內皮細胞損傷是血瘀證形成的重要原因，活血化瘀治法可保護內皮細胞。血瘀證與血管內皮細胞損傷相關性研究包括臨床研究和實驗研究。臨床研究著重于內皮細胞功能變化與血瘀證的相關性及活血化瘀藥物和復方對內皮細胞的保護作用，實驗研究著重于內皮細胞形態和功能變化與血瘀證的相關性及活血化瘀藥物和復方對內皮細胞的保護作用。下一步研究要堅持“病證結合”的研究思路，采用系統生物學的方法進行研究，并且要加強對臨床常見的血瘀證兼證的個性特征的研究。
現代醫學認為血管內皮細胞不僅是血液和血管平滑肌的屏障，而且是高度活躍的代謝庫，它能合成多種血管活性物質，對血管的舒縮功能與血液的流動性有重要的調節作用，對維持正常血液循環有重要的生理意義。內皮細胞形態結構的損傷及功能改變是血瘀證形成的重要原因，活血化瘀治法可改善內皮細胞損傷。
臨床研究
1．內皮細胞功能變化與血瘀證
李曉明等測定52例血瘀證和非血瘀證原發性腎小球疾病(primary glomerular disease，PGD)患者血漿內皮素(endothexin，ET)、血小板a顆粒膜蛋白140(a granule membrane protein 140，GMP-140)水平，結果顯示：PGD患者中ET及GMP-140水平均明顯高于對照組，其中腎衰患者兩者水平增高更為顯著，表現為PGD血瘀證組>PGD非瘀證組>對照組，且呈明顯的正相關。林桂永等發現冠心病穩定期心絞痛血液中血管性假血友病因子(von Willebrand factor，vWF)、P-選擇素(P-Selectin)、細胞間黏附分子-1(intercellular mdhesion molecule-1，ICAM-1)含量增高，變化趨勢均為：氣滯血瘀組>氣虛血瘀組>非血瘀證(心腎陰虛)組>對照組。胡小勤等發現高血壓病血瘀證患者血清可以促進內皮細胞分泌vWF、TM、EPCR等損傷標志物。楊軍輝等發現血管內皮損傷是冠心病血瘀證的重要因素，其分子標記物血清一氧化氮(nitricoxide，NO)、ET、VWF值是冠心病血瘀證不同亞型微觀辨證的可靠指標。林雪娟等發現纖溶系統活性降低是心病血瘀證形成的重要因素，綜合分析組織型纖溶酶原激活劑(tissue-plasminogen activator，t-PA)、組織型纖溶酶原抑制物(plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1)、PAI-1/t-PA的水平對心病血瘀證的診斷有—定意義。
2．活血化瘀藥物、復方對內皮細胞的保護作用
李先濤等觀察益氣活血法擬定的腦栓康處方對急性缺血性中風氣虛血瘀證血管內皮細胞功能的影響，結果腦栓康可升高組織型纖溶酶原激活物(t-PA)、6-酮-前列腺素(6-Keto-PGF1α)，抗凝血酶Ⅲ(antithrombinⅢ，AT-Ⅲ)、NO、降鈣素基因相關肽(calcitonin gene related peptide，CGRP)含量，降低PAI、血栓素B2(thromboxane，TXB2)、ET含量。
實驗研究
1．內皮細胞形態變化與血瘀證
陳云波等探討了血瘀證兔模型血管內皮細胞培養的形態結構改變，光鏡和電鏡均發現模型兔原代培養的血管內皮細胞出現病理性損傷。陳云波等將正常組、血瘀證組和高脂組兔血清加入同批培養的正常兔主動脈內皮細胞中，發現血瘀證組、高脂組兔血清均嚴重損傷體外培養的正常血管內皮細胞。
2．內皮細胞功能變化與血瘀證
王奇等探討實驗性血瘀證兔模型血管內皮細胞抗凝與纖溶功能的變化規律，發現血瘀證組兔血漿t-PA和AT-Ⅲ的活性降低，PAI的活性升高，血瘀證組原代培養液中的t-PA活性較正常組降低，PAI活性升高。侯孟君等發現血瘀證模型組兔體內血管內皮細胞中組成型一氧化氮合酶(constitutive nitric oxide synthase，eNOS)基因表達以及血漿和原代培養液中NO水平皆明顯下降，同期血漿中NO含量與內皮細胞中eNOSmRNA的表達水平呈正相關，兩組間體外培養的傳代細胞中eNOS基因表達及培養液上清中NO含量無明顯差異，但NO水平都比各自原代培養液中的明顯升高。江歡等研究發現具有中醫“熱毒血瘀證”表征的大鼠早期血漿ET、熱休克蛋白-70(HSP-70)、TXB2和6-Keto-PGF1α增高，晚期TXB2/6-Keto-PGF1α降低。認為“熱毒血瘀證”存在血管內皮細胞損傷。黃敏等將54只新兩蘭大白兔按隨機分組法分為6組，分別為氣虛血瘀組、氣滯血瘀組、寒凝血瘀組、熱毒血瘀組、外傷血瘀組、正常對照組，比較各組血瘀證目征積分，同時觀測各組血清中vWF、ET-1水平的變化，結果造模前各組血瘀證目征積分無顯著差異，造模后各模型組與對照組相比均有顯著差異(P<0．01)，認為血瘀證目征與血管內皮細胞損傷有密切相關。
3．活血化瘀藥物、復方對內皮細胞的保護作用
王奇等從形態學角度觀察血府逐瘀湯對用血瘀證兔血清損傷的內皮細胞的保護作用，結果：光鏡觀察發現，血瘀證組內皮細胞收縮變形，細胞間隙增大，胞漿中有暗色顆粒；血瘀證加中藥組細胞間隙增大不明顯；電鏡觀察發現，血瘀證組細胞內飲液泡明顯增多，粗面內質網數目減少并有擴張，線粒體細小、嵴不清，細胞表面僅有少量細長的微絨毛，末端膨大融合，而血瘀證加中藥組粗面內質網數日較少但不擴張，細胞表面微絨毛未見融合，說明血府逐瘀湯對血管內皮細胞有一定的保護作用。王奇等發現血府逐瘀湯能調節內皮細胞ET/NO的釋放，恢復抗凝、纖溶功能，對內皮細胞起到一定的保護作用。李風文等”發現水蛭、丹參及其復方可明顯減少血瘀模型的循環內皮細胞CEC數及全血黏度、纖維蛋白原和紅細胞壓積亦增加。陳利國等補陽還五湯能減少造模動物ICAM-1、血管細胞黏附分子-1(vascular adhesion molecule-1，VCAM-1)、血小板內皮細胞黏附分子-1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1，PECAM-1)、誘生型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase，iNOS)的表達，而且隨著藥物劑量的減少，各分子表達呈遞增趨勢，具有明顯的量效關系。周濤發現補腎活血中藥有改善血管內皮細胞功能的作用。
總結
血瘀證見于臨床多科疾病，血管內皮損傷為其共同的病理基礎。血管內皮細胞既是血液和血管平滑肌的屏障，又是重要的內分泌器官，所分泌的血管活性物質既能局部也能全身起作用，而一旦血管內皮細胞受損，各種調控機體血凝-纖溶及血管舒縮功能的活性物質的正常水平必然發生變化，從而引起機體易于出血或形成血栓。因此，深入研究血管內皮細胞形態結構及內分泌功能的改變與血瘀證的關系，必能進一步加深對血瘀證實質的了解。觀察活血化瘀方藥對血管內皮細胞結構及功能的影響，可進一步闡釋活血化瘀藥物的作用機制。當然，這一切需要以中醫理論為指導，密切聯系中醫臨床，以期在將現代科學方法引入血瘀證與活血化瘀研究的過程中，更能反映宏觀辨證和微觀辨證的統一。
目前，關于血瘀證與血管內皮細胞相關性研究，還存在以下不足：
①重視單純的血瘀證，忽略與疾病的結合；
②觀察指標比較有限、分散，缺乏系統性；
③血瘀證多以兼證的形式存在，目前對血瘀證兼證的研究較少。
下一步研究要堅持以下幾個原則：
①堅持“病證結合”的研究思路；
②采用系統生物學的方法進行研究；
③加強對臨床常見的血瘀證兼證的個性特征的研究。